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去除Cys側(cè)鏈tBu保護(hù)基團(tuán)的方法

Cys(tBu)一般在TFA和I2的情況下比較穩(wěn)定,因此常用來組合生產(chǎn)第三對及以上二硫鍵的多肽,而不打亂前面的二硫鍵配對.
去除掉tBu的方法通常有醋酸汞和三氯甲基硅烷/二苯基亞砜法.
下面介紹一下醋酸汞法的操作步驟
1. 將帶tBu的多肽溶解在冰TFA中(5-10mg/ml)
2. 加入10倍當(dāng)量的醋酸汞,攪拌反應(yīng)3小時(shí)
3. 減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)掉多余的TFA,再溶解到10%的醋酸水溶液中
4. 加入20倍當(dāng)量的巰基乙醇,靜置5小時(shí)
5. 離心去除沉淀再進(jìn)行脫鹽或者HPLC純化.



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